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spo0A基因对酪丁酸梭菌芽孢形成性能和小鼠肠道微生态的影响

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spo0A基因对酪丁酸梭菌芽孢形成性能和小鼠肠道微生态的影响
论文目录
 
摘要第1-4页
abstract第4-6页
缩写词及英汉对照第6-10页
1 前言第10-18页
 1.1 酪丁酸梭菌的研究概况第10-11页
  1.1.1 酪丁酸梭菌对肠道微生态的作用机制第10-11页
   1.1.1.1 抑制致病菌生长第10-11页
   1.1.1.2 增强动物肠道免疫应答能力第11页
   1.1.1.3 分泌益生素第11页
 1.2 酪丁酸梭菌的芽孢形成机制简介第11-16页
  1.2.1 酪丁酸梭菌的应用第14-16页
   1.2.1.1 酪丁酸梭菌在畜牧生产上的应用第14-15页
   1.2.1.2 酪丁酸梭菌在生物医学上的应用第15页
   1.2.1.3 其他工业上的应用第15-16页
 1.3 本研究的背景、主要目的与主要内容第16-18页
2 材料与方法第18-31页
 2.1 实验材料第18-21页
  2.1.1 引物第18页
  2.1.2 菌株和质粒第18-19页
  2.1.3 实验动物第19页
  2.1.4 仪器设备第19-20页
  2.1.5 实验试剂第20页
   2.1.5.1 主要试剂及试剂盒第20页
  2.1.6 主要试剂配方第20-21页
   2.1.6.1 抗生素试剂及主要培养基第20-21页
   2.1.6.2 基因组抽提与质粒抽提试剂第21页
   2.1.6.3 琼脂糖凝胶电泳试剂第21页
   2.1.6.4 其他常用储备试剂第21页
 2.2 实验方法第21-31页
  2.2.1 细菌基因组提取第21-22页
  2.2.2 PCR反应第22-23页
  2.2.3 重叠序列延伸PCR第23-24页
  2.2.4 质粒的抽提第24页
  2.2.5 PCR产物纯化与酶切第24-25页
  2.2.6 琼脂糖凝胶电泳第25页
  2.2.7 质粒酶切与DNA片段回收第25页
  2.2.8 感受态细胞制备第25-26页
  2.2.9 连接与热激转化第26页
  2.2.10 基因测序第26页
  2.2.11 接合转化第26-27页
  2.2.12 细菌RNA抽提及逆转录cDNA第27-28页
  2.2.13 实时荧光定量PCR第28-29页
  2.2.14 数据分析第29页
  2.2.15 生长曲线与芽孢曲线的测定第29页
  2.2.16 胃肠道环境模拟第29页
  2.2.17 动物实验第29-31页
3 结果与分析第31-50页
 3.1 spo0A酪丁酸梭菌过表达株的构建第31-34页
  3.1.1 基因的PCR扩增第31-32页
  3.1.2 构建质粒载体第32-34页
   3.1.2.1 质粒构建方案第32页
   3.1.2.2 质粒pMTL82515-thl的构建第32-33页
   3.1.2.3 质粒pMTL82515-spo0A的构建第33-34页
   3.1.2.4 spo0A酪丁酸梭菌过表达株的构建第34页
 3.2 芽孢形成通路中关键调节因子的表达水平第34-35页
 3.3 体外实验第35-40页
  3.3.1 野生型酪丁酸梭菌与spo0A酪丁酸梭菌过表达株生长曲线的测定第35-36页
  3.3.2 野生型酪丁酸梭菌与spo0A酪丁酸梭菌过表达株芽孢生成曲线的测定第36-37页
  3.3.3 野生型酪丁酸梭菌与spo0A酪丁酸梭菌过表达株芽孢生成率的测定第37-38页
  3.3.4 胃肠道模拟环境中酪丁酸梭菌的存活率检测第38-40页
 3.4 动物实验第40-50页
  3.4.1 酪丁酸梭菌对小鼠生长的影响第40-41页
  3.4.2 酪丁酸梭菌对小鼠肠道结构的影响第41-43页
  3.4.3 酪丁酸梭菌对小鼠肠道菌群的影响第43-50页
4 讨论与结论第50-53页
 4.1 讨论第50-52页
 4.2 结论第52-53页
致谢第53-54页
参考文献第54-59页

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