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OsRNase Z2调控水稻线性和环式电子流转换的机理研究

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OsRNase Z2调控水稻线性和环式电子流转换的机理研究
论文目录
 
摘要第1-5页
abstract第5-7页
英文缩略词与英汉对照第7-14页
1 前言第14-26页
 1.1 高等植物的循环电子传递第14-17页
  1.1.1 依赖于PGR5-PGRL1蛋白的PSⅠ循环电子传递第15-16页
  1.1.2 依赖NDH的PSⅠ循环电子传递第16-17页
 1.2 PSⅠ环式电子传递与ATP合成第17页
 1.3 植物叶绿体NDH复合体的研究第17-22页
  1.3.1 NDH复合体的亚基组成第17-18页
  1.3.2 NDH复合体的结构第18-19页
  1.3.3 NDH复合体对于围绕PSI的CEF的作用第19-20页
  1.3.4 C4植物叶绿体NDH复合体的研究第20-22页
 1.4 叶绿素荧光检测技术在光合作用中的应用第22-24页
 1.5 RNase Z的功能研究分析第24-25页
 1.6 本研究的目的与意义第25-26页
2 材料与方法第26-43页
 2.1 材料第26-28页
  2.1.1 植物材料第26页
  2.1.2 载体与菌株第26-27页
  2.1.3 PCR扩增引物第27页
  2.1.4 仪器设备第27页
  2.1.5 试剂来源第27-28页
 2.2 主要试剂配方第28-32页
  2.2.1 抗生素和诱导剂第28页
  2.2.2 细菌培养基第28页
  2.2.3 琼脂糖凝胶所需溶液第28页
  2.2.4 质粒抽提溶液第28页
  2.2.5 植物DNA抽提液第28页
  2.2.6 植物激素母液第28-29页
  2.2.7 水稻转化培养基第29页
  2.2.8 RNA抽提溶液第29页
  2.2.9 可溶性(His)6融合蛋白纯化缓冲液第29-30页
  2.2.10 蛋白提取及电泳溶液第30-31页
  2.2.11 Western blot溶液第31页
  2.2.12 体外切割实验缓冲液第31页
  2.2.13 类囊体膜蛋白提取液配制第31页
  2.2.14 BN-PAGE电泳母液配制第31-32页
 2.3 方法第32-43页
  2.3.1 微量抽提法提取水稻DNA第32-33页
  2.3.2 PCR扩增第33页
  2.3.3 目的片断的回收第33页
  2.3.4 连接反应第33页
  2.3.5 连接产物转化大肠杆菌第33-34页
  2.3.6 重组子的鉴定和保存第34页
  2.3.7 农杆菌介导转化水稻愈伤组织第34-35页
  2.3.8 RNA的抽提第35页
  2.3.9 RNA的电泳检测第35页
  2.3.10 RNA中DNA的去除第35-36页
  2.3.11 反转录反应第36页
  2.3.12 Western blot方法第36-37页
  2.3.13 可溶性(His)6融合蛋白纯化第37-38页
  2.3.14 体外切割试验第38页
  2.3.15 实时荧光定量PCR第38-39页
  2.3.16 类囊体膜蛋白提取第39-40页
  2.3.17 BN-PAGE电泳第40页
  2.3.18 Li-cor6400便携式光合仪基本使用方法第40-41页
  2.3.19 Dual-PAM-100调制叶绿素荧光仪使用方法第41-42页
  2.3.20 数据处理第42-43页
3 结果与分析第43-65页
 3.1 OsRNase Z2生物信息学分析第43-48页
  3.1.1 OsRNase Z2基因核酸序列与蛋白结构分析第43-44页
  3.1.2 OsRNase Z2蛋白同源性分析第44-45页
  3.1.3 OsRNase Z2干涉转基因植株的获得第45-46页
  3.1.4 OsRNase Z2干涉转基因植株表型研究第46-48页
 3.2 OsRNaseZ2对NDH复合体的调控作用第48-60页
  3.2.1 OsRNase Z2干涉植株转录组的分析验证第48-49页
  3.2.2 OsRNase Z2基因及其相关靶基因的表达特征研究第49-51页
  3.2.3 OsRNase Z2蛋白的功能研究分析第51-56页
   3.2.3.0 OsRNase Z2可溶性蛋白的原核表达纯化第51-52页
   3.2.3.1 OsRNase Z2点突变可溶性蛋白的原核表达纯化第52-54页
   3.2.3.2 ndhF和ndhD基因的体外转录以及OsRNaseZ2可溶性蛋白的体外切割第54-55页
   3.2.3.3 OsRNase Z2体外加工pre-tRNA第55-56页
  3.2.4 OsRNase Z2对内囊体膜蛋白的影响第56-58页
   3.2.4.1 OsRNase Z2对NDH-PSI超复合体的影响第56-57页
   3.2.4.2 OsRNase Z2影响类囊体膜NDH复合体亚基蛋白累积第57-58页
  3.2.5 OsRNase Z2对光合电子传递的调控第58-60页
   3.2.5.1 NDH复合体活性的测定第58-59页
   3.2.5.2 P700+暗还原速率的测定第59-60页
 3.3 ndhD及ndhF生物信息学分析第60-65页
  3.3.1 ndhD及ndhF生物信息学分析第60-61页
  3.3.2 ndhD及ndhF过表达转基因植株的获得第61-62页
  3.3.3 叶绿素荧光参数的测定第62-65页
   3.3.3.1 NDH复合体活性的测定第62-63页
   3.3.3.2 P700+暗还原速率的测定第63-65页
4 讨论与结论第65-68页
 4.1 OsRNase Z2功能分析第65-66页
 4.2 OsRNase Z2对叶绿体NDH复合体的调控第66页
 4.3 PSI-NDH的环式电子传递第66-67页
 4.4 结论第67-68页
致谢第68-69页
参考文献第69-73页

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