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鸡CH25H催化产生25HC发挥抗ALV-J功能

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鸡CH25H催化产生25HC发挥抗ALV-J功能
论文目录
 
摘要第1-4页
abstract第4-8页
1 前言第8-15页
 1.1 研究背景第8-14页
  1.1.1 禽白血病病毒第8页
  1.1.2 ALV-J的出现及危害第8-9页
  1.1.3 ALV-J的结构及复制方式第9-10页
  1.1.4 干扰素第10页
  1.1.5 干扰素刺激基因的产生第10-11页
  1.1.6 干扰素刺激基因的研究进展第11-12页
  1.1.7 鸡CH25H基因第12-13页
  1.1.8 CRISPR/Cas9技术编辑原理第13-14页
 1.2 研究的目的及意义第14页
 1.3 研究的技术路线第14-15页
2 材料与方法第15-28页
 2.1 材料第15-18页
  2.1.1 主要仪器与设备第15-16页
  2.1.2 毒种、细胞与实验动物第16页
  2.1.3 细胞相关试剂、酶类及试剂盒第16-17页
  2.1.4 鸡干扰素、抗体第17页
  2.1.5 基因工程及载体第17页
  2.1.6 培养基及相关溶液配制第17-18页
 2.2 方法第18-28页
  2.2.1 动物实验伦理声明第18页
  2.2.2 实验动物攻毒及样品收集第18-19页
  2.2.3 动物感染ALV-J检测第19-20页
  2.2.4 鸡外周血淋巴细胞的分离第20页
  2.2.5 ALV抗原ELISA检测第20页
  2.2.6 病毒血症分析第20页
  2.2.7 SCAU-HN06病毒扩繁及毒价测定第20-21页
  2.2.8 鸡IFNα作用DF-1细胞以及ALV-J感染DF-1细胞第21页
  2.2.9 载体的构建及转染第21-23页
  2.2.10 RNA抽提、qPCR检测及RT-PCR扩增第23-25页
  2.2.11 CRISPR/Cas9技术编辑DF-1细胞的CH25H基因第25-26页
  2.2.12 单个克隆细胞系建立第26-27页
  2.2.13 25HC毒性检测第27页
  2.2.14 WesternBlot检测第27页
  2.2.15 数据分析第27-28页
3 结果与分析第28-42页
 3.1 鸡干扰素的抗ALV-J作用第28-33页
  3.1.1 注射鸡干扰素后感染ALV-J的SPF雏鸡病毒动态分析第28-29页
  3.1.2 ALV-J及干扰素处理雏鸡中ISGs分析第29-30页
  3.1.3 干扰素刺激DF-1细胞后ALV-J的复制动态分析第30页
  3.1.4 细胞水平上分析ALV-J及干扰素处理后ISGs的表达情况第30-31页
  3.1.5 抗ALV-JISGs的验证第31-33页
 3.2 CH25H抗ALV-J分子机制第33-42页
  3.2.1 ALV-J感染后CH25H上调表达第33-34页
  3.2.2 过表达CH25H抑制ALV-J的复制第34-36页
  3.2.3 敲除CH25H促进ALV-J的复制第36-40页
  3.2.4 25HC抑制ALV-J的复制第40-41页
  3.2.5 CH25H催化产生25HC发挥抗ALV-J功能第41-42页
4 讨论第42-46页
 4.1 鸡干扰素的抗ALV-J功能第42页
 4.2 抗ALV-J干扰素刺激基因的筛选第42-44页
 4.3 CH25H催化产生25HC发挥抗ALV-J功能第44-46页
5 结论第46-47页
致谢第47-48页
参考文献第48-54页
附录A sgRNA-VK001-08重组质粒测序结果第54-55页
附录B 硕士期间参与发表的论文第55页

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