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喜树碱-胆酸偶联物的肝靶向、抗肿瘤机制及其对脓毒症小鼠肝损伤的保护作用

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喜树碱-胆酸偶联物的肝靶向、抗肿瘤机制及其对脓毒症小鼠肝损伤的保护作用
论文目录
 
摘要第1-8页
ABSTRACT第8-11页
符号及缩写说明第17-22页
第一章 绪论第22-32页
    1.1 喜树碱简介第22-28页
        1.1.1 喜树碱类化合物抗肿瘤机制第22-24页
        1.1.2 喜树碱类化合物构效关系第24-25页
        1.1.3 喜树碱类化合物抗肿瘤研究进展第25-28页
    1.2 胆酸简介第28-29页
        1.2.1 胆酸的生物合成和生理功能第28页
        1.2.2 胆酸的肝肠循环第28-29页
        1.2.3 胆酸作为药物载体的研究进展第29页
    1.3 脓毒症简介第29-30页
        1.3.1 脓毒症临床体征和病理机制第30页
        1.3.2 脓毒症治疗第30页
        1.3.3 Topo I抑制剂对脓毒症的作用第30页
    1.4 本论文研究的目的与意义第30-32页
第二章 G2的合成与体外肝靶向研究第32-41页
    2.1 试验材料和仪器第32-33页
        2.1.1 细胞第32页
        2.1.2 试剂第32-33页
        2.1.3 仪器第33页
    2.2 试验方法第33-38页
        2.2.1 G2 的合成分离纯化第33-34页
        2.2.2 细胞的复苏、传代培养及冻存第34-35页
        2.2.3 MTT法检测脱氧胆酸对G2 的细胞毒性影响第35页
        2.2.4 脱氧胆酸对HepG22D细胞摄取G2 的影响第35-37页
        2.2.5 脱氧胆酸对HepG23D细胞摄取G2 的影响第37页
        2.2.6 统计学处理第37-38页
    2.3 试验结果与讨论第38-40页
        2.3.1 G2 的制备第38页
        2.3.2 脱氧胆酸对G2和CPT的细胞毒性影响第38-39页
        2.3.3 CPT和 G2 的标准曲线第39页
        2.3.4 蛋白含量标准曲线第39页
        2.3.5 脱氧胆酸对HepG22D细胞摄取CPT和 G2 的影响第39-40页
        2.3.6 脱氧胆酸对HepG23D细胞摄取CPT和 G2 的影响第40页
    2.4 本章小结第40-41页
第三章 G2在小鼠体内的组织分布研究第41-55页
    3.1 试验材料和仪器第41页
        3.1.1 试验材料第41页
        3.1.2 试验仪器第41页
        3.1.3 试验动物第41页
    3.2 试验方法第41-44页
        3.2.1 色谱条件第41-42页
        3.2.2 标准溶液及工作液的配制第42页
        3.2.3 样品处理第42页
        3.2.4 方法专属性考察第42-43页
        3.2.5 标准曲线建立及定量下限的确定第43页
        3.2.6 精密度和准确度测定第43页
        3.2.7 提取回收率和基质效应测定第43页
        3.2.8 稳定性考察第43-44页
        3.2.9 灌胃给予CPT和 G2 的组织分布研究第44页
        3.2.10 数据分析第44页
    3.3 试验结果与讨论第44-53页
        3.3.1 特异性第44-45页
        3.3.2 标准曲线和定量下限第45-46页
        3.3.3 精密度和准确度第46-48页
        3.3.4 提取回收率和基质效应第48-49页
        3.3.5 稳定性第49-51页
        3.3.6 组织分布结果第51-53页
    3.4 本章小结第53-55页
第四章 G2口服吸收利用度研究第55-67页
    4.1 试验材料和仪器第55-56页
        4.1.1 细胞第55页
        4.1.2 试剂第55-56页
        4.1.3 试验仪器第56页
        4.1.4 试验动物第56页
    4.2 试验方法第56-59页
        4.2.1 脱氧胆酸对G2 的细胞毒性影响第56页
        4.2.2 Na~+对Caco-22D细胞摄取G2 的影响第56页
        4.2.3 脱氧胆酸对Caco-23D细胞摄取G2 的影响第56-57页
        4.2.4 G2和CPT在大鼠体内血药动力学研究第57-59页
    4.3 试验结果第59-66页
        4.3.1 脱氧胆酸对G2和CPT对Caco-2 细胞的细胞毒性影响第59-60页
        4.3.2 Na~+对Caco-22D细胞摄取G2和CPT的影响第60-61页
        4.3.3 脱氧胆酸对Caco-23D细胞摄取G2和CPT的影响第61页
        4.3.4 G2和CPT在大鼠体内血药动力学研究第61-66页
    4.4 本章小结第66-67页
第五章 G2 诱导肝癌细胞HepG2 和肠癌细胞HCT116 凋亡机制研究第67-88页
    5.1 试验材料和仪器第67-69页
        5.1.1 细胞第67页
        5.1.2 试剂第67-68页
        5.1.3 仪器第68-69页
    5.2 试验方法第69-75页
        5.2.1 MTT法检测细胞活性第69页
        5.2.2 Topo I抑制试验第69页
        5.2.3 HepG2和HCT116 细胞的细胞周期分布检测第69-70页
        5.2.4 Hoechst33258 染色检测细胞凋亡第70页
        5.2.5 Annexin V/PI双染法检测细胞凋亡第70页
        5.2.6 HepG2和HCT116 细胞中ROS水平的检测第70页
        5.2.7 HepG2和HCT116 细胞中线粒体膜电位(ΔΨm)的检测第70页
        5.2.8 HepG2和HCT116 细胞中Caspase酶活性的检测第70-71页
        5.2.9 细胞凋亡通路和细胞周期相关基因表达水平的检测第71-74页
        5.2.10 细胞凋亡通路和细胞周期相关蛋白表达水平的检测第74-75页
    5.3 试验结果与讨论第71-87页
        5.3.1 MTT法评价G2 的细胞毒性第75-76页
        5.3.2 G2对Topo I活性的抑制第76页
        5.3.3 G2 对细胞周期分布的影响第76-77页
        5.3.4 荧光显微镜观察G2 诱导细胞凋亡形态第77-78页
        5.3.5 Annexin V/PI双染法检测G2 对细胞凋亡的影响第78-79页
        5.3.6 G2 对活性氧生成水平的影响第79-81页
        5.3.7 G2 对线粒体膜电位的影响第81-82页
        5.3.8 G2对Caspase酶活性的影响第82-83页
        5.3.9 G2 对细胞凋亡通路和细胞周期相关基因表达水平的影响第83-85页
        5.3.10 G2 对细胞凋亡通路和细胞周期相关蛋白表达水平的影响第81-87页
    5.4 本章小结第87-88页
第六章 G2对脓毒症小鼠肝损伤的保护作用第88-98页
    6.1 材料与方法第88-89页
        6.1.1 实验动物第88页
        6.1.2 主要试剂第88-89页
        6.1.3 主要仪器第89页
    6.2 实验方法第89-93页
        6.2.1 实验动物分组及模型建立第89-90页
        6.2.2 标本留取及处理第90页
        6.2.3 观察小鼠状态和生存率第90页
        6.2.4 血清ALT、AST检测第90-91页
        6.2.5 肝匀浆MPO活性检测第91-92页
        6.2.6 血清炎症因子TNFα、IL-1β、IL-6 检测第92页
        6.2.7 小鼠肝脏苏木素-伊红(Hematoxylin-Eosin,HE)染色第92页
        6.2.8 Western Blot检测第92-93页
    6.3 试验结果与讨论第93-97页
        6.3.1 小鼠一般状况第93页
        6.3.2 小鼠生存率情况第93页
        6.3.3 HE染色观察小鼠肝脏组织病理学第93-94页
        6.3.4 小鼠血清ALT、AST水平第94-95页
        6.3.5 小鼠血清炎症因子TNFα、IL-1β、IL-6 水平第95页
        6.3.6 小鼠肝匀浆MPO水平第95-96页
        6.3.7 Western Blot检测小鼠肝脏组织蛋白表达第96-97页
    6.4 本章小结第97-98页
第七章 总结与展望第98-100页
参考文献第100-111页
致谢第111-112页
作者简介第112-113页
    1 作者简历第112页
    2 攻读博士学位期间发表的学术论文第112-113页
学位论文数据集第113页

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